1926年12月1日至28日召开于长沙。参加大会的有五十二个县、两个特别区的农协代表一百七十人，代表会员一百三十多万人。中共湖南区委向大会提出了湖南农民目前最低限度的要求二十八项。大会通过了宣言和减租减息、铲除贪官污吏、土豪劣绅、建立农民政权、组织农民自卫武装等决议案。最后，选举了湖南省农民协会委员会，正式成立了湖南省农民协会，并建议成立全国农民协会。毛泽东应邀参加会议，先后在欢迎会上和大会闭幕典礼上作了重要讲话。他强调指出：国民革命的中心问题是农民问题，无论是打倒帝国主义、打倒军阀、土豪劣绅，或者是发展商业和教育事业，都要靠农民问题的解决。毛泽东还严厉斥责了攻击农民运动的谬论。这次大会加速了湖南农村大革命的步伐，到1927年1月，湖南全省已有五十多个县组织了农民协会，会员激增到二百万人，能直接领导的群众达一千万人。